飞蓬草中多酚化合物提取条件优化(3)

溶剂萃取法的原理,利用了化合物在两种互不相溶或微溶的溶剂中溶解度差异,使化合物从溶解效果较差的溶剂内转移到溶解效果较好的溶剂中[11]。重复


溶剂萃取法的原理,利用了化合物在两种互不相溶或微溶的溶剂中溶解度差异,使化合物从溶解效果较差的溶剂内转移到溶解效果较好的溶剂中[11]。重复相同操作数次,可将大部分目标化合物从中提取出来。在实验室中使用普通的分液漏斗即可进行溶剂萃取,仪器成本较低,且操作方法简单易学因而得到广泛应用。不仅如此,使用溶剂萃取适用于工业生产应用,也可用连续机械化处理。但同时也存在诸多问题,例如提取过程中常使用的有机溶剂易于挥发,可能对人体有害;若使用手工操作较为繁琐,且费时等。

超临界流体萃取技术利用超临界流体的特性进行提取,即在不同压力和温度下,超临界流体溶解能力有所差异,是一种新型的高效萃取技术。使用超临界流体萃取技术提取质量比常规提取方法高且无有机溶剂污染残留问题,是种环保、低成本的提取方法。但其在多酚类成分提取中的应用还处在探索阶段,适用范围不确定,仪器设备研制还有待完善,目前无法广泛运用于工厂生产加工。

综合比较上述提取方法,考虑到各方面的因素的影响,当前使用溶剂萃取法最合适。由于多酚类成分结构复杂且遇热容易发生化学反应并改变原有结构,采用微波辅助提取、热回流提取等方法容易导致温度过高,从而降低提取量;而超高压快速提取技术以及超临界萃取技术这类新兴技术,由于实验技术尚未成熟且仪器研发成本较高,目前只能应用于小规模的科学实验研究,暂时不适用于工业生产。

贤景春等人对飞蓬草多酚提取做过相关实验,结果表明对小飞蓬多酚提取效果的影响最大的因素是乙醇浓度高低,其次是料液比大小,然后依次为浸提时间长短和浸提温度高低[12]。当提取条件为浸提时间60 min,乙醇浓度50 %,料液比1∶20,浸提温度70 ℃时,提取量达到最大值,提取率为12.751 mg/g。

2飞蓬草多酚化合物提取条件优化

2.1材料与方法

2.1.1材料与仪器

飞蓬草植株采自于杭州师范大学植物园,采集足够新鲜植株后用保鲜袋包装好带回实验室,一小时内进行清洗、烘干,并将茎、叶、花分离开来搅碎。

数显恒温水浴锅HH-6   由常州国华电器有限公司生产;spectrum 722E型可见分光光度计  由上海光谱仪器有限公司生产;福林酚  由北京索莱宝科技有限公司生产; FG-3A-57 真空冷冻干燥机 由西安太康生物科技有限公司生产;SD25-12DCUN 超声波提取机  由宁波新芝生物科技股份有限公司生产。

2.1.2实验方法

飞蓬草中茎、叶、花组分的多酚提取  称取烘干的飞蓬草1.00 g放入100 mL的锥形瓶中,按已知浓度和已知液料比加入已知一定浓度的乙醇,在预设好温度的水浴锅中水浴30 min,然后放入超声波提取机,并以360 W功率提取一定时间。完成后使用滤纸进行过滤,收集上清液,可得到多酚提取液[13]。

测定飞蓬草茎、叶、花组分的植物多酚含量  量取3 mL的蒸馏水添加入试管中,再加入稀释后的1 mL多酚提取液,振荡摇匀数次后加入0.25 mL的Folin-Ciocalteu试剂(与蒸馏水按体积1:1的比例稀释),在室温下反应3 min后,加入20 %的0.75 mL 的碳酸钠溶液。将液体混合并在室温下反应0.5 h后,装入比色皿并放入紫外分光光度计,测量在765 nm处的吸光度[13]。根据吸光度值计算出多酚提取液中没食子酸浓度,然后根据以下公式计算可得到多酚提取量。

多酚提取量/(mg GAE/ g ) =    

式中C:没食子酸质量浓度,μg/mL; V:提取液体积,mL; N:稀释倍数; M:取样量,g。

2.2单因素变量对多酚提取量的影响

2.2.1乙醇浓度对飞蓬草多酚的影响