细菌性肺炎病人的红细胞力学特性研究(4)

1.3.4红细胞的测量方法 表明红细胞变形性的一个非常重要的指标就是细胞膜的切变弹性模量,细胞膜的切变弹性模量越大,对于细胞的形变来说,也就意味


1.3.4红细胞的测量方法

表明红细胞变形性的一个非常重要的指标就是细胞膜的切变弹性模量,细胞膜的切变弹性模量越大,对于细胞的形变来说,也就意味着越弱。对红细胞测量方法的研究,在国际上主要分为宏观法和微观法。从宏观方面考虑有有激光衍射法、光度法、粘度法、电测量法以及微孔滤筛法等,从微观方面考虑有微吸管法、光镊牵拉法以及底部附着法等[16]。粘性测量法相比其他方法的优点在于它的测量方法比较简单简单,操作也很方便容易,并且可以通过一次测量就能得到红细胞群体的平均变形性,缺点就是无法精确的测量出单个细胞的变形行为,也没有办法得出单个红细胞变形以及作用力这两者之间的一种定量关系。微管吸吮法微管吸吮法是在显微镜下利用微操纵器操纵微吸管来吸取红细胞。这个方法的优点在于我们可以在变形过程中特别清晰的得到应力一应变之间的关系,缺点是这种方法不适合用在大细胞群体上,也无法反映出红细胞在无扰状态下的自主形变。很多方法都或多或少的有一些缺点和不足。这次实验研究采用光镊牵拉法。光镊牵拉法原理方法比较简单,精度较高,最重要的是,光镊技术对红细胞不会造成损伤。在光镊牵拉实验中,红细胞直径一端粘附在样品池底部,另一端粘连着二氧化硅微球。

2 材料和方法  

   本章主要讲述的是这次实验中需要用的试剂、仪器和测量和测量红细胞的切变弹性模量的具体方法。

2.1实验的仪器和材料

2.1.1实验的仪器

实验仪器包括光镊系统,超声波清洗机,小型离心机。其中光镊系统的结构组成由下图2-1所示,包括半导体激光器(连续或脉冲激光器)作为激光光源、光学显微物镜、精密载物台、光镊移动控制杆、位移精密检测传感装置,再加上CCD摄像头和计算机组成。光镊系统的原理是用激光双向分束器,然后通过它的反射,在物镜上显示出来,倍数放大为100,最后观测点上汇聚的则为光镊。光镊中所用的光源是Nd YAG激光器,输出功率其最大值可达到5W,它的波长是1064纳米。在改变激光的角度时,可以根据声光相互作用的机制,这样的话,我们可以在省去使用操作柄的同时,非常方便的变化光阱的位置。自动平台上就是样品池,操作柄来回移动自动平台,微粒则也在移动相对于样品池来说。通过这种方法,我们可以操控微粒。