集胞藻6803slr0011基因的克隆及植物转化载体的构(2)

2024-08-19 22:33 96684 来源：论文网

1.材料与方法 1.1实验材料 1.1.1菌株周口师范学院植物遗传与分子育种重点实验室提供所需的大肠杆菌Trans5α感受态细胞和农杆菌GV3101感受态细胞。 1.1.2质粒

1.材料与方法

1.1实验材料

1.1.1菌株

周口师范学院植物遗传与分子育种重点实验室提供所需的大肠杆菌Trans5α感受态细胞和农杆菌GV3101感受态细胞。

1.1.2质粒载体

周口师范学院植物遗传与分子育种重点实验室提供所需的集胞藻6803二氧化碳浓缩机制相关基因组DNA、pDONR207以及35ss-3xHA。

1.1.2酶和试剂

1.1.2.1酶

KAPAHIFIDNA聚合酶(KAPABIOSYTEMS)

2×TaqPCRStarMixwithloadingDye(Genstar)

BP酶

LR酶

1.1.2.2抗生素

kanamycin(Sigma)

Gentamycin(Sigma)

Spectinomycin(Sigma)

Rifampicin(Sigma)

1.1.2.3生化试剂及配方

蒸馏水、50%甘油、75%乙醇、LB培养基（见表1）、琼脂、50×TAE缓冲液（表2）、高纯度质粒小量快速提取试剂盒购自艾德莱生物科技公司、等。